293T（人胚腎細胞）都有哪些應用？

　　293T（人胚腎細胞）來源于以腺病毒5DNA進行轉化的腎細胞，適于滴定人腺病毒。細胞表達一種不尋常的由整聯蛋白beta-1亞基和玻聯蛋白alpha-v亞基組成的玻聯蛋白細胞表面受體。Ad5插入片段進行了克隆和測序，結果表明堿基1-4344插入到了19號染色體（19q13.2）。293細胞比較容易轉染，是一個很常用的表達研究外源基因的細胞株。293細胞的缺陷是生長過程中貼壁強度比較小。所以在實驗過程中容易流失，從而影響實驗結果。

　　

　　293T（人胚腎細胞）用于納米Fe3O4/Cr（Ⅵ）復合物對大腸桿菌及人胚腎細胞的毒性研究。

　　

　　以Cr（Ⅵ）為典型重金屬污染物的代表，利用納米四氧化三鐵吸附水中Cr（Ⅵ）,選擇大腸桿菌E.coli和人胚腎細胞HEK293兩種不同層級的生物作為模型,研究磁性納米四氧化三鐵吸附Cr（Ⅵ）離子后的復合物對兩種生物產生的毒性效應。本研究的濃度作用范圍如下:MNPs濃度為250μg/mL,Cr（Ⅵ）濃度分別為1、2、3μg/mL,MNPs吸附不同濃度Cr（Ⅵ）后的MNPs/Cr（Ⅵ）復合物,作用時間為24h。

　　

　　結果如下:1、本研究采用共沉淀法,合成了納米四氧化三鐵顆粒（MNPs）,并利用MNPs吸附水中的Cr（Ⅵ）,制備了MNPs/Cr（Ⅵ）復合物。研究發現,MNPs能夠有效的吸附水中的Cr（Ⅵ）離子;MNPs對Cr（Ⅵ）的吸附符合Langmuir模型。MNPs/Cr（Ⅵ）復合物呈球形,顆粒大小一致,分布均勻,單分散性好,性質比較穩定。

　　

　　2、在本研究的濃度范圍和作用時間下,Cr（Ⅵ）對大腸桿菌E.coli具有明顯的毒性效應,并且與Cr（Ⅵ）濃度呈劑量相關性。在Cr（Ⅵ）離子的作用下,E.coli的生長受到明顯的抑制,Cr（Ⅵ）能夠引起E.coli內活性氧顯著升高,并導致氧化損傷,使細胞結構嚴重受損。MNPs及MNPs/Cr（Ⅵ）復合物對E.coli沒有顯著的毒性效應。與空白組比較,生長曲線沒有出現明顯的變化,在MNPs、MNPs/Cr（Ⅵ）復合物作用下,E.coli內活性氧略微升高,但并未導致明顯的氧化損傷。通過透射電鏡觀察到僅有少量的MNPs、MNPs/Cr（Ⅵ）復合物吸附在大腸桿菌的表面,但細胞膜的通透性及細胞結構沒有發生明顯變化。MNPs/Cr（Ⅵ）復合物在LB培養基中都是帶負電的顆粒,且水合粒徑都在200nm左右,導致MNPs/Cr（Ⅵ）復合物沒有進入到大腸桿菌細胞內,僅有少量的MNPs/Cr（Ⅵ）復合物吸附在大腸桿菌表面,盡管產生了少量的活性氧,但不足以導致細胞代謝失衡。因此,MNPs及MNPs/Cr（Ⅵ）復合物對E.coli沒有產生明顯的毒性效應。

　　

　　3、在本研究的濃度范圍和作用時間下,Cr（Ⅵ）對293T（人胚腎細胞）HEK293的毒性效應顯著,并且與Cr（Ⅵ）濃度劑量相關。在Cr（Ⅵ）離子的作用下,細胞的形態和密度都發生了顯著變化,細胞活力明顯下降,同時引起細胞內活性氧顯著升高,導致氧化損傷,并誘導了細胞的凋亡。在MNPs、MNPs/Cr（Ⅵ）復合物的作用下,與空白組相比,細胞的形態、密度和細胞活力均沒有出現明顯的變化。

　　

　　MNPs吸附Cr（Ⅵ）后,顯著降低了Cr（Ⅵ）對HEK293細胞誘導產生的破壞作用,MNPs/Cr（Ⅵ）復合物沒有引發細胞的氧化損傷,證實了細胞膜和細胞結構沒有受到明顯的破壞。在DMEM培養基中,由于MNPs/Cr（Ⅵ）復合物的水合粒徑基本都在200～400nm之間,且表面電荷都是帶負電,導致絕大多數的復合物不能進入細胞內,MNPs/Cr（Ⅵ）復合物在HEK293細胞內的攝取量極小,這些顆粒是從細胞外通過質膜內陷形成囊泡進入細胞,但沒有進入到細胞核中,在正常代謝途徑下不會導致細胞的凋亡。因此,MNPs及MNPs/Cr（Ⅵ）復合物對HEK293細胞沒有顯著毒性效應。