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磷酸鹽緩沖液需要稀釋到多少才可以使用？

更新時間：2025-08-29 | 點擊率：1035

磷酸鹽緩沖液(PBS)是否需要稀釋以及稀釋到何種濃度，主要取決于具體實驗需求。以下是不同場景下的稀釋建議及注意事項：

無需稀釋的場景
- 細胞實驗：標準PBS(0.01 M，pH 7.4)可直接用于細胞洗滌、重懸或傳代培養。
- 分子生物學實驗：如Western blot、ELISA中樣本稀釋或洗滌，通常使用標準濃度。
- 組織學處理：組織切片漂洗、抗原修復后洗滌等，標準濃度即可滿足需求。
需要稀釋的場景
- 高鹽敏感實驗：如某些蛋白質透析或酶活性測定，需降低NaCl濃度(如稀釋至0.14 M)。
- 特殊細胞類型：某些原代細胞(如神經元)對滲透壓敏感，需用低鹽PBS(如0.001 M磷酸鹽+0.137 M NaCl)。
- 藥物穩定性測試：模擬體內低鹽環境時，可能需稀釋至生理鹽水濃度(0.9% NaCl，約0.15 M)。

稀釋比例	目標濃度	典型用途
1:1（原液）	0.01 M磷酸鹽 + 0.137 M NaCl	細胞培養、Western blot、ELISA、免疫組化洗滌
1:10	0.001 M磷酸鹽 + 0.0137 M NaCl	特殊細胞（如神經元）洗滌、低鹽需求實驗
1:100	0.0001 M磷酸鹽 + 0.00137 M NaCl	**低鹽環境模擬（如某些酶活性測定）
調整NaCl濃度	0.01 M磷酸鹽 + 0.014 M NaCl	降低滲透壓至生理鹽水水平（0.9% NaCl）

體積比稀釋
- 示例：將10 mL標準PBS加入90 mL去離子水，得到1:10稀釋液。
- 工具：使用移液器或量筒精確量取，避免污染。
質量體積比稀釋
- 適用場景：需精確控制NaCl濃度時（如配制0.01 M磷酸鹽 + 0.014 M NaCl）。
- 計算：根據目標濃度計算所需NaCl質量（如0.014 M × 58.44 g/mol × 1 L = 0.818 g NaCl/L）。
分步稀釋
- 步驟：先稀釋磷酸鹽濃度，再調整NaCl濃度（如需同時降低兩者）。

避免反復凍融
- 稀釋后的PBS應分裝保存，避免反復解凍導致pH或滲透壓變化。
兼容性測試
- *次使用稀釋液時，需進行預實驗驗證其對細胞活性或實驗結果的影響（如MTT實驗檢測細胞毒性）。
標記與記錄
- 稀釋液需明確標注濃度、pH、配制日期及滅菌狀態，避免混淆。
特殊實驗需求
- 透皮吸收實驗：可能需稀釋至與接收液成分一致（如含4% BSA的PBS）。
- 蛋白質電泳：需使用無NaCl的磷酸鹽緩沖液（如Tris-Glycine系統）。

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