實(shí)驗(yàn)常見問題：bEnd.3細(xì)胞形態(tài)異常？從接種密度到代謝廢物排查步驟

通過感染表達(dá)多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體來轉(zhuǎn)化細(xì)胞。

別稱：bEND.3;b.End3;Bend.3;bEnd3;brain-derived Endothelial cells.3
種屬：小鼠
生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
凍存條件：凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO
：溫度：液氮
培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）：生長(zhǎng)培養(yǎng)基：DMEM+10% FBS+1% P/S
：培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO?，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例：1:2-1:4
推薦換液頻率：2-3次/周
組織來源：大腦皮層
細(xì)胞類型：轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生物安全等級(jí)：BSL-1
保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CRL-2299 BCRC; 60515 ECACC; 96091929

注意事項(xiàng)

1.該細(xì)胞在低密度下形態(tài)不規(guī)則，細(xì)胞數(shù)量少，鋪展面積大，高密度后形態(tài)會(huì)趨于一致，胞體密集。

2.細(xì)胞增殖偏慢，初次傳代建議1:2，細(xì)胞穩(wěn)定后建議傳代比例也不超過1:4。

3.注意觀察培養(yǎng)基顏色，顏色偏紫會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞漂浮增加。

4.消化時(shí)間會(huì)隨著細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間和細(xì)胞密度而有所不同，需要結(jié)合消化時(shí)細(xì)胞狀態(tài)來判斷，消化到細(xì)胞可以滑落方可終止。

常見問題

Q1:bEnd.3細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候有較多漂浮的細(xì)胞和碎片是否正常?

細(xì)胞生長(zhǎng)過程中會(huì)有大約10%活細(xì)胞單顆漂浮，這部分細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)不會(huì)貼壁，培養(yǎng)過程中不用特別處理，生長(zhǎng)過程中會(huì)產(chǎn)生碎片。

Q2:bEnd.3細(xì)胞通常消化多久？

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng)越難消化，每次消化時(shí)間可能不固定，消化時(shí)以細(xì)胞鏡下狀態(tài)為準(zhǔn)，細(xì)胞觸角收縮，細(xì)胞間隙明顯變大，輕拍培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以脫落時(shí)可終止消化，注意輕柔吹打細(xì)胞。

Q3:bEnd.3細(xì)胞形態(tài)有很多觸角是否正常？為什么低密度和高密度細(xì)胞形態(tài)不一樣？

這個(gè)細(xì)胞低密度呈現(xiàn)不規(guī)則細(xì)胞形態(tài)，細(xì)胞鋪展會(huì)比較大，高密度呈規(guī)則纖維狀形態(tài)會(huì)更規(guī)則。

引用文獻(xiàn)

• Engineered Extracellular Vesicles Modified by Angiopep-2 Peptide Promote Targeted Repair of Spinal Cord Injury and Brain Inflammation(2025)

  期刊：ACS Nano

  DOI：10.1021/acsnano.4c14675

  影響因子：15.8

  引用產(chǎn)品： C8-D1A 細(xì)胞, bEnd.3 [BEND3] 細(xì)胞

• Traditional Chinese Medicine Borneol-Based Polymeric Micelles Intracerebral Drug Delivery System for Precisely Pathogenesis-Adaptive Treatment of Ischemic Stroke(2025)

  期刊：Advanced Science

  DOI：10.1002/advs.202410889

  影響因子：14.3

  引用產(chǎn)品： BV2 細(xì)胞, bEnd.3 [BEND3] 細(xì)胞, SH-SY5Y [SHSY-5Y] 細(xì)胞