細胞學堂 | RAW 264.7誘導極化及鑒定大全

細菌和脂多糖（LPS）可以誘導巨噬細胞向M1型分化，產(chǎn)生促炎細胞因子，抵抗病原入侵，但也會造成機體損傷，在實驗中可采用2.5ng/mL IFN-γ和200ng/mL LPS共同作用12小時誘導其極化；

白細胞介素（IL-4）可以誘導巨噬細胞向M2型分化，分泌抗炎細胞因子，并在組織修復與重建和腫瘤的形成過程中發(fā)揮作用，在實驗中可采用10ng/mL IL-4作用12小時誘導其極化。

WB可以分析RAW264.7細胞iNOS、YM-1和Arg-1的表達水平（如圖3）；

圖3. WB分析照射對IL-4誘導的RAW264.7細胞YM-1和Arg-1的表達影響

流式細胞術（FCM）可以分析RAW264.7細胞表面CD86和CD206的表達（如圖4）；

圖4. 流式細胞術分析照射對IL-4誘導的小鼠RAW264.7細胞CD206和CD209的表達

實時定量 PCR 和 ELISA 可以分析IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-12 及 IL-10 等細胞因子的表達及分泌(如圖5）；

圖5. 用于實時熒光定量PCR的引物序列

Griess reagent 可以分析細胞培養(yǎng)上清 NO 生成（如圖6）。

圖6. 不同樣品對RAW 264.7中NO產(chǎn)生的影響

參考文獻

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