大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞該如何保存和應(yīng)用？

　　大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是哺乳動(dòng)物骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞亞群，具有多種分化潛能，可分化為骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)和成肌細(xì)胞。它們不僅機(jī)械地支持骨髓中的造血干細(xì)胞(HSC)，而且還分泌多種生長(zhǎng)因子（如IL-6、IL-11、LIF、M-CSF和SCF）來(lái)支持造血。

　　

　　在骨髓間充質(zhì)細(xì)胞的原代培養(yǎng)過(guò)程中，可在約24小時(shí)內(nèi)發(fā)生貼壁生長(zhǎng)。細(xì)胞呈圓形、梭形和三角形，生長(zhǎng)緩慢。液體交換后細(xì)胞增殖明顯，呈梭形為主，形態(tài)多樣。70%-80%可在10-14天融合，達(dá)到通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)。傳代細(xì)胞形狀單一，有紡錘形或扁平形，增殖至細(xì)胞融合時(shí)呈渦旋狀和放射狀排列。

　　

　　大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞*培養(yǎng)基特別添加了能有效改善細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和特選的優(yōu)質(zhì)胎牛血清，適用于Wistar大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)細(xì)胞。培養(yǎng)基分裝于小瓶（100～200ml）中使用，瓶口用旋蓋塞緊。根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)需要配制相應(yīng)的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。一般細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基為培養(yǎng)基+10%胎牛血清，最后按1%體積分?jǐn)?shù)加入雙抗體儲(chǔ)存液（青霉素+鏈霉素），使青霉素和鏈霉素終濃度為100u/ml，分別為100u/ml。

　　

　　客戶可根據(jù)自身需要選擇新鮮或冷凍原代細(xì)胞。如為新鮮原代細(xì)胞，客戶收到后應(yīng)立即放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中，靜置2-3H后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作。如果是冷凍細(xì)胞，客戶應(yīng)立即將細(xì)胞放入液氮中，-80℃冰箱或在收到細(xì)胞后立即復(fù)蘇。這些細(xì)胞只能用于科學(xué)研究，不能用于臨床。

　　

　　經(jīng)檢測(cè)，大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有良好的增殖分化潛能，可分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞等。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示CD29、CD44、CD105陽(yáng)性，CD34、CD45陰性。使用干冰進(jìn)行儲(chǔ)存和運(yùn)輸。接收細(xì)胞時(shí)，一些冰已*融化。請(qǐng)立即對(duì)細(xì)胞進(jìn)行復(fù)蘇和培養(yǎng)；如果還有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存。請(qǐng)根據(jù)條件存放細(xì)胞。不要將電池置于高溫環(huán)境中。